Энциклопедия здоровья МОСЛОР

АЛКОТЕСТ

Инструкция для медицинского применения набора реактивов АЛКОТЕСТ

Набор реактивов АЛКОТЕСТ предназначен для количественного определения этанола в различных биологических жидкостях человека и других образцах. Он широко используется в клинико-диагностических лабораториях, в научно-исследовательской практике, а также в судебно-медицинской экспертизе в качестве средства первичного скрининга.

С помощью этого набора можно анализировать содержание алкоголя в цельной крови, плазме, сыворотке, слюне и моче.

Набор также пригоден для определения этанола в лекарственных препаратах, пищевых продуктах и бродильных средах, расширяя область его применения.

Метод анализа основан на специфической ферментативной реакции, которая позволяет точно измерить концентрацию этанола в исследуемом образце.

Набор АЛКОТЕСТ рассчитан на проведение определенного количества анализов, что делает его удобным для лабораторного использования.

На этой странице

Назначение

Набор используется для количественного анализа этанола в биологических жидкостях (цельной крови, плазме, сыворотке, слюне и моче) и предназначен для использования в клинико-диагностической и научно-исследовательской практике, а также судмедэкспертизе в качестве средства первичного скрининга проб.

Набор пригоден для определения этанола в лекарственных препаратах, пищевых продуктах и бродильных средах.

Набор рассчитан на 100 анализов (при объеме пробы 4 мл).

Набор хранить при температуре от 0 ºС до +8 ºС.

Принцип метода

Этанол при действии алкогольоксидазы окисляется кислородом воздуха до ацетальдегида и перекиси водорода. Последний в сопряженной пероксидазной реакции окисляет хромоген до цветного продукта, который определяется фотометрически:

СН3СН2ОН + О2 $\xrightarrow{\text{алкоголь-оксидаза}}$ СН3СНО + Н2О2

ЅН2 + Н2О2 $\xrightarrow{\text{пероксидаза}}$ S + 2Н2О

(краситель)

Реактивы

Набор содержит следующие компоненты:

  • "Хромоген". Сухая смесь хромогена с составляющими фосфатного буфера (2,45 г).
  • "Ферменты". Стабилизированная суспензия алкогольоксидазы и пероксидазы в сульфате аммония.
  • "Стандарт". Калибровочный раствор этанола, 10 г/л (стабилизированный).
  • "Осадитель". 40%-ный раствор трихлоруксусной кислоты (10 мл).

Дополнительный реактив: 0,8 М HCl (концентрированную соляную кислоту разводят в 15 раз водой: 10 мл кислоты + 140 мл воды).

Допустимые величины содержания алкоголя в биологических жидкостях человека

  • Сыворотка, плазма и цельная кровь - до 0,25 г/л (пороговая норма).
  • Превышение величины 1 г/л принимается как юридическое доказательство алкогольного опьянения.

Характеристики метода:

  • Воспроизводимость (коэффициент вариации) – (5-7)% (в зависимости от диапазона концентраций).
  • Линейность калибровочной кривой к концентрации алкоголя 4,5 г/л в исходной пробе (до 45 мкг спирта в фотометрируемом растворе), что соответствует оптической плотности до 1,0 - 1,3.

Приготовление рабочего реагента

  1. "Хромоген". Содержимое флакона 1 поместить в термостойкий стакан или колбу на 0,5 л, добавить 350 мл дистиллированной воды и нагреть смесь до полного растворения. Перед использованием раствор охладить до комнатной температуры.

    Хранить раствор в герметично закрытой посуде при температуре от +8 ºС до +20 ºС в затемненном месте до 2-х недель.

  2. "Реагент". В день анализа поместить взболтанную суспензию ферментов из флакона 2 в приведенный до комнатной температуры раствор хромогена и смесь хорошо размешать.

    Реагент используют в день приготовления.

    Примечание: При проведении меньшего числа анализов готовят соответствующее количество реагента, смешивая раствор хромогена и взболтанную суспензию ферментов в соотношении 700:1, а именно:

    Vхр = 3,5 · N (мл); Vе = 0,5 · N / 100 (мл);

    где Vхр - объем раствора хромогена, мл;

    Vе - объем суспензии ферментов, мл;

    0,5 - паспортный объем суспензии ферментов, мл;

    N - число анализов (включая слепую и калибровочную пробы).

  3. "Стандарт". Развести стандартный раствор этанола в 10 раз водой (0,1 мл + 0,9 мл Н2О).

    Раствор используют в день приготовления как калибрант с концентрацией 1 г/л.

    Примечание: Все операции со спиртом следует проводить очень тщательно, предотвращая случайное попадание его в реагенты.

  4. "Осадитель". Содержимое флакона 4 (10 мл 40% ТХУ) развести в 10 раз водой (добавить 90 мл Н2О).

    Примечание: "Осадитель" является концентрированным раствором сильной кислоты, поэтому при работе с ним необходимо соблюдать соответствующие правила техники безопасности.

Проведение анализа

Параметры фотометрирования:

  • Длина волны - 450 нм (спектрофотометр или фотоколориметр).
  • Кюветы 1 см.
  • Температура инкубации - комнатная (около 20 ºС).

Подготовка проб крови (сыворотки или плазмы):

  • В небольшие стеклянные пробирки вносят по 0,1 мл проб только что взятой крови (для дезинфекции используют водный раствор риванола).
  • Добавляют по 0,9 мл разведенного (4%) раствора "осадителя" и встряхивают.
  • Пробы выдерживают при комнатной температуре 5 мин.
  • Центрифугируют для осаждения белков при 3000 об/мин в течение 10 мин.
  • Для анализа используют надосадочную жидкость.

Аналогично обрабатывают слепую и калибровочную пробы.

Схема подготовки образцов:

Раствор Исследовательская проба Калибровочная проба Слепая проба
4%-ный осадитель, мл 0,9 0,9 0,9
Кровь (сыворотка или плазма), мл 0,1 - -
Калибровочный раствор этанола (1 г/л), мл - 0,1 -
Вода, мл - - 0,1

Анализ проводят серийно по 20-30 исследовательских проб с постановкой в каждой серии калибровочной и слепой проб по такой схеме:

Схема аналитической процедуры:

Раствор Исследовательская проба Калибровочная проба Слепая проба
Надосадочная жидкость (соответствующая для каждой пробы), мл 0,1 0,1 0,1
Рабочий реагент, мл [текст обрывается в предоставленном источнике] [текст обрывается в предоставленном источнике] [текст обрывается в предоставленном источнике]

Процедура анализа

Информация о полной процедуре анализа в предоставленном тексте отсутствует, поскольку раздел обрывается.

Расчет результатов

Информация о расчете результатов анализа в предоставленном тексте отсутствует.

Контроль качества

Информация о контроле качества в предоставленном тексте отсутствует.

Меры предосторожности

Информация о мерах предосторожности в предоставленном тексте присутствует частично (обращение со спиртом, обращение с осадителем), но полный раздел отсутствует.

Ограничения метода

Информация об ограничениях метода в предоставленном тексте отсутствует.

Комплектация набора

Информация о полной комплектации набора (кроме перечня реактивов) в предоставленном тексте отсутствует.

Утилизация

Информация об утилизации в предоставленном тексте отсутствует.

Условия хранения

Набор хранить при температуре от 0 ºС до +8 ºС, как указано в разделе "Назначение".

Раствор хромогена хранить в герметично закрытой посуде при температуре от +8 ºС до +20 ºС в затемненном месте до 2-х недель, как указано в разделе "Приготовление рабочего реагента".

Рабочий реагент используют в день приготовления, как указано в разделе "Приготовление рабочего реагента".

Разведенный стандарт этанола используют в день приготовления, как указано в разделе "Приготовление рабочего реагента".

Информация о других условиях хранения и сроке годности в полном объеме в предоставленном тексте отсутствует.

Срок годности

Информация о сроке годности набора в целом в предоставленном тексте отсутствует.

Часто задаваемые вопросы (FAQ)

Что такое набор реактивов АЛКОТЕСТ?

АЛКОТЕСТ - это набор реактивов, предназначенный для количественного определения этанола в биологических и других жидкостях.

Какие виды образцов можно анализировать с помощью набора?

Можно анализировать цельную кровь, плазму, сыворотку, слюну, мочу, лекарственные препараты, пищевые продукты и бродильные среды.

Где применяется набор АЛКОТЕСТ?

Используется в клинико-диагностических и научно-исследовательских лабораториях, а также в судебно-медицинской экспертизе.

На чем основан принцип метода определения этанола?

Метод основан на ферментативном окислении этанола с последующим образованием цветного продукта, измеряемого фотометрически.

Какие основные компоненты входят в набор реактивов?

В набор входят "Хромоген", "Ферменты", "Стандарт" этанола и "Осадитель".

Каковы допустимые нормы содержания алкоголя в крови человека?

Пороговая норма - до 0,25 г/л. Превышение 1 г/л является юридическим доказательством опьянения.

Какова воспроизводимость метода?

Коэффициент вариации составляет 5-7%.

Как подготовить образец крови для анализа?

Образец крови обрабатывается раствором "осадителя", затем центрифугируется для осаждения белков, и для анализа используется надосадочная жидкость.

Какие параметры используются для фотометрирования?

Используется длина волны 450 нм, кюветы 1 см, температура инкубации около 20 ºС.

Нужно ли соблюдать меры предосторожности при работе с реактивами?

Да, особенно при работе с концентрированным раствором "осадителя", который является сильной кислотой.

Известны ли ограничения метода?

Информация об ограничениях метода в предоставленном тексте отсутствует.

Известен ли срок годности набора?

Информация о сроке годности набора в целом в предоставленном тексте отсутствует.

Известны ли полная процедура анализа и расчет результатов?

Информация о полной процедуре анализа и расчете результатов в предоставленном тексте отсутствует.

Как хранить набор реактивов?

Набор хранить при температуре от 0 ºС до +8 ºС.

Ключевые слова

алкотест набор реактивов инструкция, определение этанола, анализ крови на алкоголь, анализ мочи на алкоголь, судмедэкспертиза алкоголь, диагностика алкоголя, этанол в биожидкостях, enzymatic alcohol test, количественное определение алкоголя, набор для анализа алкоголя.

Отказ от ответственности: Данная информация является переписанной инструкцией для медицинского применения набора реактивов АЛКОТЕСТ и основана на части предоставленного текста. Она является неполной. Информация о полной процедуре анализа, расчете результатов, контроле качества, мерах предосторожности (кроме обращения с некоторыми реактивами), ограничениях метода, полной комплектации набора, утилизации и сроке годности в полном объеме отсутствует. Информация предназначена исключительно для ознакомления с доступной частью информации и не заменяет полную официальную инструкцию производителя. Перед использованием набора реактивов необходимо внимательно ознакомиться с полной официальной инструкцией производителя и строго следовать указаниям.

Дата публикации: 23.04.25